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1、(四)计算实验2、血红蛋白(HGB) :诊断各种贫血和红细胞增多症;方法步骤血细胞计数板系一长方形厚玻片,常用的改良牛氏(Improved-Neubauer) 计数板在横沟的两边各有一计数室,两计数室结构完全相同。

2、计数室较两边的盖玻片支柱低0.1毫米。

3、因此,放上盖玻片时,计数板与其间距即计数室空间的高为0.1毫米(图8-1)。

4、在低倍显微镜下可见计数室被双线划分成9个边长为1毫米的大方格。

5、四角的大方格又各分为16个中方格,这是用来计数白细胞的。

6、大方格被划分为25个中方格,每一中方格又划分成16个小方格(图8-2称25×16,也有的计数板为16×25的,小方格面积一致)。

7、大方格的四角及中心5个中方格(16×25者则为四角上的中方格)为红细胞或血小板计数范围。

8、先用试管稀释法制备禽类血细胞悬液:将禽类红细胞稀释液Ⅰ、Ⅱ分别置水浴锅中预热到41~42℃,取Ⅰ液1mL于试管中,用吸血管加入新鲜鸡血(或肝素抗凝血)20霯,再加入Ⅱ液1mL混匀,置该水浴锅中保温50s左右,置室温,即为待检的血细胞悬液。

9、可用于充液计数。

10、取干洁的计数板,置于水平的显微镜载物台上,盖上盖玻片,使两侧各空出少许。

11、摇匀血细胞悬液,用滴管吸取,将滴管尖轻轻置于盖玻片边缘外,让滴出的血细胞悬液凭毛细管作用吸入计数室内,刚好充满计数室为宜(图8-3)。

12、静置2min后计数,先用低倍镜观察,不均匀则抛弃。

13、计数时用虹彩、集光器、反光镜等调节入射光角度和强度,认清 计数室位置。

14、采用“由上至下,由左至右,顺序如弓”的顺序,对压边线细胞采取“数上不数下,数左不数右”的原则(图8~4)。

15、依次计数并记录5个中方格中分别有多少个红细胞。

16、(三)血小板计数按计数室构造及血液稀释倍数,将血细胞11、平均血小板体积(MPV):判断血小板减少的原因;计数结果换算成每立方毫米中血细胞的个数。

17、以每100mL血液中的血红蛋白量(g)乘以10再除以红细胞数(106/mm3)得红细胞平均血红蛋白量(MCN,单位μμg)。

18、要求与思考题1.计算结果,报告中简要说明计算过程。

19、求出本组同学测定的均值并评价之。

20、2.了解各类稀释液成分,分析各物质的作用。

21、注意事项1.充液前应充分混匀血细胞悬液,充液要连续、适量,充液后应待血细胞下沉后再计2.计数板、盖玻片、吸血管及测定管等用过后必须立即按要求洗涤干净。

22、附注:1.本法可同时计数禽类白细胞数,计算方法也类似。

23、Ⅰ液NaCl 0.9g加蒸馏水至100.0mLⅡ液 0.8mL加蒸馏水至100.0mL3.哺乳类红细胞稀释液可用生理盐水或阿扬(Hayem)氏液(NaCl 1g,Na2SO4·10H2O 5g,HgCl2 0.5,加蒸馏水至200mL过滤)。

24、白细胞稀释液成分为冰醋酸0.1mL,1%龙胆紫1mL加蒸馏水至100mL,或直接用2%。

25、4.血小板复方尿素稀释液配方为:尿素10g,柠檬酸钠0.5g,甲醛0.1mL,加蒸馏水到100mL,混合,待完全溶解后过滤。

26、置冰箱内可保存1~2周。

本文到这结束,希望上面文章对大家有所帮助。


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